細(xì)胞劃痕（wound healing）法是簡捷測定細(xì)胞遷移遠(yuǎn)動和修復(fù)能力的方法，類似體外傷口愈合模型，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實驗設(shè)定的時間，取出細(xì)胞培養(yǎng)板，觀察周邊細(xì)胞的生長遷移能力，實驗通常需設(shè)定正常對照組和實驗組，實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等的組別，通過不同分組之間的細(xì)胞對于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力。
二、實驗步驟
1.所有要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min。
2.1）先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過孔，每孔至少穿過5條線。
2）在空中加入約 5×105個細(xì)胞（具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿），37°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
3）第二天用10µl槍頭比著直尺，與標(biāo)記線垂直的方向劃兩條平行線，槍頭要垂直，不能傾斜。
4）用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。
三、注意事項
1.在用PBS緩沖液沖洗時，注意貼壁慢慢加入，以免沖散單層貼璧細(xì)胞，影響
實驗拍照結(jié)果。
2.一般做劃痕實驗，都是無血清或者低血清(<2%），否則細(xì)胞增殖就不能忽略。
（也可用絲裂酶處理一小時）
3.按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成者干交叉點，作為固定的檢
測點，以解決前后觀察時位置不固定的問題。